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一種TNFSF15可溶性蛋白的純化方法
本發(fā)明涉及一種TNFSF15可溶性蛋白的純化方法，包括如下步驟：(1).IPTG誘導、(2).菌體裂解、(3).上柱洗脫、(4).除鹽分裝。本發(fā)明純化方案通過低溫誘導的方式，并且以很低的IPTG誘導濃度，降低蛋白在包涵體中的表達，提升可溶性蛋白的含量，并用較為溫和的裂解純化方式，提高蛋白的穩(wěn)定性和活性。并且操作簡便，制作周期短，消耗資源少，方便放大生產(chǎn)。
南開大學
2021-04-10
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吳益東教授團隊揭示Bt殺蟲蛋白“雙通道”進攻機制
南京農(nóng)業(yè)大學植物保護學院吳益東教授團隊在Bt殺蟲機制研究方面取得重要進展，發(fā)現(xiàn)了Bt殺蟲蛋白對棉鈴蟲的一種新型“雙通道”殺蟲機制。 吳益東教授團隊的最新研究發(fā)現(xiàn)，棉鈴蟲ABC轉(zhuǎn)運蛋白ABCC2和ABCC3均為Bt受體，用CRISPR基因編輯技術分別敲除這兩個基因，不能獲得Bt抗性；而同時敲除這兩個基因后獲得了超過1.5萬倍的極高水平抗性。這意味著，同時敲除這兩個基因會使Bt毒素對棉鈴蟲的進攻完全失效。 吳益東解釋，ABCC2和ABCC3是一對結(jié)構(gòu)高度相似、功能相互重疊的Bt受體，Bt毒素在尋找受體發(fā)起攻勢時，相當于獲取了深入敵營的“雙重通道”。因此，棉鈴蟲缺失ABCC2和ABCC3中的任何一個受體均不影響B(tài)t的殺蟲效果，從而限制了棉鈴蟲在ABCC2和ABCC3通路上的抗性進化能力。 棉鈴蟲和Bt毒素的攻防之間，存在著相互適應、協(xié)同進化的復雜關系。在Bt毒素對棉鈴蟲“雙通道”殺蟲機制的壓制下，棉鈴蟲可以避其鋒芒，在Bt毒素進攻薄弱環(huán)節(jié)進化出新的抗性機制。在吳益東教授團隊的前期研究中，發(fā)現(xiàn)了棉鈴蟲為削弱Bt殺蟲能力進化出的2種抗性機制：一種是棉鈴蟲Bt受體HaCad（一種鈣粘蛋白）通過基因缺失突變，另一種是四跨膜蛋白TSPAN1通過L31S點突變，在這兩種情況下，棉鈴蟲通過喪失HaCad的受體功能或增強腸道修復能力，使Bt抗性顯著增強。 團隊的研究還發(fā)現(xiàn)，我國棉鈴蟲田間抗性個體攜帶的抗性基因在2010年前以HaCad突變?yōu)橹鳎?013年后以TSPAN1點突變?yōu)橹鳎形丛谔镩g檢測到ABCC2和ABCC3突變，其中原因，可能正是這次的研究所揭示的，是ABCC2和ABCC3這一對功能冗余的受體為Bt毒素的進攻提供了相互并聯(lián)的“雙通道”，因此捆住了棉鈴蟲利用這一對受體發(fā)生變異而逃逸攻擊的“手腳”。
南京農(nóng)業(yè)大學
2021-02-01
萬建民院士團隊揭示稻米蛋白品質(zhì)形成分子機制
我校萬建民院士團隊在植物學權(quán)威刊物《The Plant Cell》在線出版了題為“GPA5encodes a Rab5a effector required for post-Golgi trafficking of rice storageproteins”的研究成果。 萬建民院士團隊發(fā)現(xiàn)了一個新的谷蛋白后高爾基體分選缺陷突變體gpa5，通過圖位克隆的方法證實GPA5編碼一個具有磷脂結(jié)合能力的植物特有調(diào)控因子。在胚乳細胞中，GPA5特異分布在致密囊泡外圍。亞細胞定位分析證實GPA5的膜定位依賴于前期鑒定的GPA1/Rab5a和GPA2/VPS9a。生化分析進一步證實GPA5可特異與GPA1/Rab5a的激活態(tài)形式互作，表明GPA5可能是GPA1/Rab5a的效應子（effector）。后續(xù)的功能研究發(fā)現(xiàn)，GPA5可與栓系復合體CORVET和含有VAMP727的膜融合復合體SNARE互作，介導致密囊泡與蛋白貯藏液泡的膜融合，以完成谷蛋白的轉(zhuǎn)運。 萬建民院士團隊以解析水稻谷蛋白合成、轉(zhuǎn)運和沉積的分子網(wǎng)絡途徑為目標，長期致力于稻米蛋白品質(zhì)改良的分子遺傳基礎研究。本研究是該團隊在《植物細胞（The Plant Cell）》和《分子植物（Molecular Plant）》等雜志相繼報道GPA1/Rab5a, GPA2/VPS9a,GPA3和GPA4/Got1B調(diào)控谷蛋白分選后，在稻米蛋白品質(zhì)形成的分子機理研究中取得的又一重要進展，進一步豐富了人們對谷蛋白轉(zhuǎn)運分子網(wǎng)絡途徑的認識，為稻米蛋白品質(zhì)的改良奠定了理論基礎。
南京農(nóng)業(yè)大學
2021-02-01
蝶蛹金小蜂抗菌蛋白Pp-AP3及其編碼的核酸序列
本發(fā)明公開了一種蝶蛹金小蜂抗菌蛋白Pp-AP3編碼的核酸序列，所分離出的DNA分子包括：編碼具有蝶蛹金小蜂抗菌蛋白Pp-AP3活性的多肽核苷酸序列，該核苷酸序列與SEQ？ID？NO：1中從核苷酸第767-871位的核苷酸序列有至少70％的同源性；或者該核苷酸序列能在40-55℃條件下與SEQ？ID？NO：1中從核苷酸第767-871位的核苷酸序列雜交。本發(fā)明還同時公開了一種蝶蛹金小蜂抗菌蛋白多肽Pp-AP3，其具有SEQ？ID？NO：2所示的氨基酸序列。本發(fā)明的蝶蛹金小蜂抗菌蛋白Pp-AP3具有抗菌性能。
浙江大學
2021-04-11
蝶蛹金小蜂抗菌蛋白Pp-AP5及其編碼的核酸序列
本發(fā)明公開了一種蝶蛹金小蜂抗菌蛋白Pp-AP5編碼的核酸序列，所分離出的DNA分子包括：編碼具有蝶蛹金小蜂抗菌蛋白Pp-AP5活性的多肽核苷酸序列，該核苷酸序列與SEQ？ID？NO：1中從核苷酸第329-454位的核苷酸序列有至少70％的同源性；或者該核苷酸序列能在40-55℃條件下與SEQ？ID？NO：1中從核苷酸第329-454位的核苷酸序列雜交。本發(fā)明還同時公開了一種蝶蛹金小蜂抗菌蛋白Pp-AP5，其具有SEQ？ID？NO：2所示的氨基酸序列。蝶蛹金小蜂抗菌蛋白Pp-AP5具有抗菌性能。
浙江大學
2021-04-11
海洋紫球藻聯(lián)產(chǎn)花生四烯酸與藻紅蛋白
-5,8,11,14-二十碳四烯酸，是屬于ω-6系列的一種人體必需的多不飽和脂肪酸(Polyunsaturated fatty acids，PUFAs)，具有廣泛的生物活性和重要的營養(yǎng)作用。ARA不僅是機體組織細胞膜的結(jié)構(gòu)成分，同時, 它也是內(nèi)循環(huán)系統(tǒng)和中樞神經(jīng)系統(tǒng)中起重要作用的前列腺素、環(huán)前列腺素和白三烯類等二十碳衍生物的直接前體。另外，ARA也是成熟母乳成分之一，它對嬰兒的視力和智力發(fā)育是必需的。因此，英國營養(yǎng)基金會和FAO/WHO推薦在嬰兒奶粉中添加DHA和ARA。ARA及其代謝產(chǎn)物的生理功效還包括：在細胞內(nèi)可發(fā)揮第二信使作用，參與造血和免疫調(diào)節(jié)，引起血管舒張，參與肝、膽多種功能的調(diào)節(jié)，引起炎癥反應及參與神經(jīng)內(nèi)分泌和促進細胞分裂等。在水產(chǎn)動物營養(yǎng)方面，ARA是許多魚類幼體、對蝦幼體的必需脂肪酸，關系到幼體的生長發(fā)育和存活。餌料中添加ARA，可提高投喂動物的生長速度和存活率。藻膽蛋白是某些藻類特有的重要捕光色蛋白,早在上個世紀初,就曾報道在藍藻和紅藻中存在強烈熒光性的紅色、紫羅藍色和藍色蛋白質(zhì)。科學研究表明，藻膽蛋白是一種既可以作為天然色素用于食品、化妝品、染料等工業(yè)上，也可制成熒光試劑，用于臨床醫(yī)學診斷和免疫化學及生物工程等研究領域中。另外，還可以制成食品和藥品用于醫(yī)療保健上，應用范圍廣闊，具有很高的開發(fā)、利用價值。藻膽蛋白主要存在于藍藻、紅藻、隱藻和少數(shù)一些甲藻中 ,其主要功能是作為光合作用的捕光色素復合體 ,在一些藻類中藻膽蛋白也可以作為儲藏蛋白 ,以使藻類在氮源缺乏的季節(jié)得以生存。已知的藻膽蛋白主要可以分為以下4大類：藻紅蛋白(Phycoerythrin,PE)、藻藍蛋白(Phycocyanin,PC)、藻紅藍蛋白(Phycoerythrocyanin,PEC)、別藻藍蛋白(Allophyxoxyanin,APC)。
廈門大學
2021-04-11
蛋白質(zhì)羰基化修飾的標記和組學鑒定
以經(jīng)典的LDE分子4-羥基壬烯醛（HNE）為模型，結(jié)合還原性二甲基化標記技術，實現(xiàn)了對外源的羰基化修飾蛋白和位點進行了直接的大規(guī)模捕獲和鑒定 (Redox Biol 2017,12, 712-718)。然而鑒定病理條件下內(nèi)源性羰基化的修飾蛋白及位點仍是該領域的重大挑戰(zhàn)。為了解決這一難題，王初課題組首次將廣泛應用于oxime ligation中的催化劑苯胺結(jié)構(gòu)引入到活性分子探針中，首先以HNE為模型分子，建立和優(yōu)化了蛋白羰基化修飾的定量化學蛋白質(zhì)組方法，實現(xiàn)了對上千個羰基化修飾位點的修飾活性的定量分析。
北京大學
2021-04-11
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一株高產(chǎn)蛋白酶的納地青霉及其應用
本發(fā)明涉及菌株保藏號為CGMCC No.12777的一株高產(chǎn)蛋白酶納地青霉(Penicillium nalgiovense)QAUS012及其應用，其特征在于，通過紫外線誘變一株原始納地青霉，篩選出經(jīng)誘變的一株高產(chǎn)蛋白酶納地青霉；菌株生長在察氏瓊脂培養(yǎng)基上，其配方為硝酸鈉3.0g，磷酸氫二鉀1.0g，硫酸鎂0.5g，氯化鉀0.5g，硫酸亞鐵0.01g，蔗糖30.0g，瓊脂15.
青島農(nóng)業(yè)大學
2021-01-12
一種谷朊蛋白膠體顆粒及其制備方法和用途
本發(fā)明公開了一種谷朊蛋白膠體顆粒及其制備方法和用途，制備方法包括：谷朊蛋白在谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶作用下發(fā)生交聯(lián)反應，形成谷朊蛋白膠體顆粒，反應體系中添加有帶伯胺基團的親水小分子，所述帶伯胺基團的親水小分子為L?賴氨酸、氨基葡萄糖和L?谷氨酸中的至少一種，所述帶伯胺基團的親水小分子與谷朊蛋白的質(zhì)量比為1:10?100。本發(fā)明在反應體系中添加了帶伯胺基團的親水小分子，谷朊蛋白發(fā)生分子間和分子內(nèi)交聯(lián)的同時，與帶伯胺基團的親水小分子發(fā)生交聯(lián)反應，一方面可以抑制谷氨酰胺轉(zhuǎn)氨酶催化谷朊蛋白中的谷氨酰胺或天冬酰胺進行去酰胺反應，另一方面由于帶伯胺基團的親水小分子含有帶電荷的基團，將賦予谷朊蛋白更高的表面電荷。
浙江大學
2021-04-13
一種豬皮膠原蛋白及低油擠壓糕點
研發(fā)階段/n一種豬皮膠原蛋白及低油擠壓糕點。該豬皮膠原蛋白由包括以下步驟的方法制備得到：將豬皮于水中浸泡后去掉內(nèi)層的油脂，然后于堿溶液中進行二次浸泡，取出后于水中漂凈；利用超臨界CO2技術萃取出剩余油脂，得到固體物；將固體物與木瓜蛋白酶和/或Alcalase蛋白酶、無菌鹽水混合，進行酶解；將酶解后的產(chǎn)物通過超濾膜，收集上層產(chǎn)物，并將上層產(chǎn)物在液氮環(huán)境下粉碎后得到所述豬皮膠原蛋白。本發(fā)明通過將豬皮膠原蛋白加入到擠壓糕點原料中，可降低傳統(tǒng)擠壓糕點成品拌料時的油脂含量。同時，添加豬皮相對于拌料時加入食用油
武漢輕工大學
2021-01-12