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利用分子技術發掘、創新番茄種質和新品種選育
番茄是世界主要的蔬菜作物，也是我國重要的大宗蔬菜。我國番茄栽培面積1800萬畝，國外番茄品種搶占我國市場競爭激烈。因此，利用現代分子技術發掘番茄抗性特異種質材料和優異基因資源、創新番茄優異種質、利用分子標記輔助技術改良親本和創制新品種，創新番茄制種技術以及新品種推廣和應用等系統性研究工作，培育出可抗衡和替代洋品牌的自有品種成為我國重要戰略需求。
分子標記輔助育種技術，是通過利用與目標性狀緊密連鎖的DNA分子標記對目標性狀進行間接選擇的現代育種技術。該技術對目標基因的轉移，不僅可在早代進行準確、穩定的選擇，而且可克服再度利用隱性基因時識別難的問題，從而加速育種進程，提高育種效率，降低育種研究成本等，與常規育種相比，該技術可提高育種效率２——３倍，具有明顯的優越性。
該技術的關鍵是與重要農藝性狀緊密連鎖的DNA分子標記的篩選與鑒定以及分子標記應用的簡便性。
項目組在國內率先開發出番茄抗根結線蟲、抗青枯病、病毒病、灰霉病、枯萎病等抗病基因和果實耐貯基因特異分子標記，這些實用性強的分子標記已成功應用于番茄多抗優質自交系選育。利用分子標記輔助選擇，聚合育成了含以色列、美、荷等國家番茄種質遺傳基礎的優良自交系420余份，為番茄品種選育提供了珍貴的基礎材料。利用選育出的自交系，聚合育成高產、優質、多抗新品種華番２號、華番３號。
項目組在發掘和創制了一批重要的新基因和新種質的同時也積累了豐富分子育種經驗，建立了完善的番茄分子育種技術平臺，該技術適用于番茄遺傳育種研究和番茄制種應用，技術體系和標記也實用于茄子、辣椒等茄科蔬菜作物的育種研究應用，該技術具有可靠的安全性。
項目組所研創的分子標記及其分子輔助育種技術在國內蔬菜育種和科研單位廣泛成功地應用，取得良好的效果；所創制的系列番茄新品種、新組合以及集成高效栽培技術，在湖北各市縣以及浙江、江蘇、陜西等省大面積推廣，取得顯著社會和經濟效益。新品種的綜合指標達到或優于國外品種。項目組所研制的番茄高效規模化雜交制種技術廣泛應用并取得顯著效益。
發布于 2020 年
華中農業大學
2021-01-12
磁性殼聚糖復合微球制備固定化葡萄糖異構酶的方法
一種磁性殼聚糖復合微球制備固定化葡萄糖異構酶的方法,其特征在于：這種磁性殼聚糖復合微球制備固定化葡萄糖異構酶的方法為：一、向0.4～0.6mol/L的FeCl230～100ml和FeCl350～100ml中,加入分子量為4000的聚乙二醇6.0～10.0g,在磁力攪拌器下充分溶解,再用氨水調節溶液至pH8～10,繼續攪拌30min～50min,用重蒸水洗滌抽濾后真空冷凍干燥即得Fe3O4磁核；二、將殼聚糖粉末在3％～6％乙酸中超聲分散10min,制0.02～0.08g/ml殼聚糖溶液,通過乳化劑與Fe3O4磁核超聲分散并電動攪拌10min進行混合,使之形成微乳體系,并與1％～5％戊二醛交聯在2000r/min下繼續攪拌2～4h,然后用石油醚、丙酮和重蒸水洗滌,抽濾真空冷凍干燥后即得磁性殼聚糖復合微球；三、將制備好的磁性殼聚糖復合微球先用磷酸緩沖液pH7.0～7.8浸泡,抽濾后加入用緩沖液稀釋后的濃度為4mg/ml～16mg/ml的葡萄糖異構酶15～20ml,在室溫搖床上振蕩4～10h,取出放入4℃靜置過夜,傾出上清液,沉淀用蒸餾水洗滌再用上述磷酸緩沖液洗滌,直至洗滌液檢測不到戊二醛和游離酶,無紫外吸收,抽濾得固定化葡萄糖異構酶
黑龍江八一農墾大學
2021-05-04
重組野生型雞半胱氨酸蛋白酶抑制劑及其應用
本發明涉及重組野生型雞半胱氨酸蛋白酶抑制劑及其應用。獲得重組野生型 cC 的方法是：利用 pGAPZ α A 載體構建野生型 cC 的表達系統；重組野生型 cC 在畢赤酵母 X-33 中表達；重組野生型 cC 的分離純化。對重組野生型 cC 對鰱魚魚糜凝膠劣化抑制作用的檢測方法是：魚糜樣品的制作；對所取魚糜樣品進行溫浴處理，加重組野生型 cC 和未加 cC 成為對照組；處理樣品進行 SDS-PAGE ，觀察結果。本發明驗證了重組野生型 cC 可以直接加入魚糜制品中，能明顯抑制魚糜制品的凝膠劣化，在加工過程中能較好的保持其彈性，且其安全、無毒，有著良好的應用前景
遼寧大學
2021-04-11
?酶催化可控釋放一氧化氮生物材料制備方法
該材料具有良好的加工性，能制備成可注射溶液、薄膜、多孔支架、以及靜電紡絲纖維膜等多種產品。由于一氧化氮能夠可控按需釋放，CS-NO及其復合材料可用于治療糖尿病下肢缺血、皮膚損傷和心梗疾病。
南開大學
2021-04-10
南極假絲酵母脂肪酶Ｂ基因及其在酵母展示中的應用
該專利首次利用畢赤酵母細胞展示技術，通過酵母細胞壁蛋白融合表達的方法，實現了脂肪酶分子的細胞自固定化，有效地解決了脂肪酶進一步加工與應用過程的穩定性；利用酵母細胞展示的一步酶固定化技術，減少了傳統固定化酶方法的酶分離純化的步驟和損失，解決了酶在使用過程的回收及反復使用的問題；將細胞展示脂肪酶的產酶水平進一步提高達到國際先進水平，為脂肪酶的在食品、飼料等領域的高效應用提供了保證；參評專利在芳香酯生產、白酒釀造及脂酶復合飼料酶制劑生產等領域實施應用，有效推動了行業技術進步和應用企業產品在國內外的競爭力，近3年相關產品新增總銷售額7.29億元，實現利稅1.34億元。獲得了第十九屆中國專利獎。
華南理工大學
2021-04-10
無酶的葡萄糖電化學傳感器及其檢測方法
本發明公開了一種無酶的葡萄糖電化學傳感器及其檢測方法，該無酶的葡萄糖電化學傳感器包括由參比電極、對電極和工作電極組成的三電極體系，所述工作電極由對葡萄糖具有電催化氧化性能的材料制成；使用該無酶的葡萄糖電化學傳感器檢測葡萄糖的方法，包括如下步驟：(1)電化學預處理工作電極：施加高負電位；(2)電化學氧化葡萄糖：施加葡萄糖氧化所需電位；(3)電化學清洗工作電極：施加正電位。本發明可去除樣品pH對檢測結果的影響，使原本需要在堿性條件下進行無酶的葡萄糖檢測，可在中性及酸性樣品中的進行，并且具有電極穩定性好、靈敏度高、重復性好等優點，具有非常廣闊的應用前景。
東南大學
2021-04-11
關于軍團菌來源的新型O-糖基轉移酶機理
糖基化修飾是一種廣泛存在且重要的蛋白質翻譯后修飾，由糖基轉移酶催化形成。抗體、疫苗等許多臨床治療性蛋白質都具有特異性糖基化修飾，且對蛋白活性至關重要。基于糖基轉移酶的化學酶法合成方法，是獲得均一糖蛋白的有效手段之一。因此，找尋性質優良的各種糖基轉移酶十分關鍵。對比真核細胞，細菌來源的糖基轉移酶具有易表達純化和催化產率高等優良性質，常被改造為人工合成糖蛋白的工具酶。然而，蛋白O-連接糖基化修飾在原核生物與真核生物之間并不保守，這成為了利用細菌糖基化系統生產真核生物O-糖蛋白的一大瓶頸。為了解決這個問題，陳興教授課題組對病原菌-宿主相互作用中的蛋白質糖基化進行了探索。 某些病原菌入侵宿主細胞后，會分泌具有糖基轉移酶活性的效應蛋白。這些效應蛋白往往利用宿主的糖供體，并且修飾宿主的靶蛋白。因此，對這類糖基轉移酶的工程化，可為實現真核生物O-糖蛋白的合成提供新的有效策略。嗜肺軍團菌效應蛋白SetA具有O-葡萄糖轉移酶活性，然而其底物蛋白尚未被鑒定。 本研究首先開發了能夠實現特異性標記和選擇性富集的化學酶法策略。他們設計被SetA利用的生物正交基團修飾的糖供體（尿苷二磷酸-6-疊氮-葡萄糖，UDP-6AzGlc），將疊氮葡萄糖6AzGlc轉移至底物蛋白。通過點擊化學反應，與可切割生物素探針連接，實現對底物蛋白的選擇性富集和位點特異性質譜鑒定(下圖)。質譜分析鑒定到分布于276個蛋白的317個O-glucose修飾位點。天然糖供體標記及軍團菌侵染實驗，驗證了SetA可以修飾眾多的底物蛋白。
北京大學
2021-04-11
一種產角蛋白酶的粘金黃桿菌及其分離方法
本發明公開了一種產角蛋白酶的粘金黃桿菌及其分離方法。所述粘金黃桿菌拉丁名為Chryseobac？terium？L99，保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏號為CGMCC？No.2295。本發明公開了該菌的形態學特征為：菌體桿狀，不產孢子，無運動性，革蘭氏染色呈陰性。本發明公開了該菌的全細胞脂肪酸主要成份為：十三甲基十四酸47.59％，二羥基-13-甲基十四酸和(或)Ω-7-順式-13甲基-十五酸15.72％，三羥基-15-甲基十六酸13.91％，Ω-9-順式-14甲基棕櫚酸9.48％。本發明還公開了該菌的16S核糖體DNA(16S？rDNA)全序列。本發明公開的分離方法包括三個步驟：普通營養培養基富集培養，以角蛋白為唯一碳氮源固體培養基初篩，以角蛋白為唯一碳氮源液體培養基的復篩。該方法快捷有效，所得菌種產酶能力強。
浙江大學
2021-04-13
尿激酶、激肽釋放酶、抑肽酶和高純度尿多酸肽聯產工藝
本項目的特點是尿綜合利用聯產工藝，可將尿激酶、激肽釋放酶，抑肽酶和高純度尿多酸肽四種成分分別提取分離出來，能大大降低成本。高純度高分子尿激酶新工藝曾與中國藥品檢定所共同舉辦了學習班，轉讓給了四家藥廠還承擔制作了國家標準品和亞太地區國際標準品，MW54，000達100%，而英國制作的樣品只有60%。尿多酸肽是國際上唯一的尿制劑抗癌藥物，但含75%尿素、銨鹽、類黑精、雜醇油等大量雜質，副作用大，穩定性差。本工藝排雜徹底，提取分離純化手段先進，成本低，收率高，純度高，活性高，無副作用。
北京航空航天大學
2021-04-13
一種酶解短直鏈淀粉中溫自組裝制備納米淀粉工藝
本發明公開了一種酶解短直鏈淀粉中溫自組裝制備納米淀粉工藝，其特征在于，具體包括如下步驟：(1)配制緩沖溶液；(2)淀粉水溶液的制備；(3)糊化；(4)酶解，接著將脫脂后的淀粉溶液用無水乙醇沉淀；(5)制短直鏈淀粉；(6)制納米淀粉。通過采用酶水解淀粉在30?70℃回生制備納米淀粉，此方法制備的納米淀粉產率高，成本低，方法更加安全環保，用其作為藥物、活性成分等的包埋材料。講拓寬其在食品工業中的應用領域。
青島農業大學
2021-04-13