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高性能角蛋白酶的高效表達(dá)與應(yīng)用研究
角蛋白酶是一種特異性蛋白酶類，可降解結(jié)構(gòu)復(fù)雜、硬質(zhì)難溶的角蛋白，具有多種優(yōu)良的催化特性，在生物加工、綠色制藥、廢棄生物質(zhì)處理、生物制革、生態(tài)紡織、洗滌劑等實(shí)際應(yīng)用中備受關(guān)注，被認(rèn)為是有著巨大應(yīng)用潛力和市場(chǎng)前景的新一代蛋白酶類。
本項(xiàng)目從角蛋白酶基因挖掘、高效表達(dá)、性能改造及其應(yīng)用研究等方面開(kāi)展了一系列工作。課題組目前建立了角蛋白酶資源庫(kù)，是我國(guó)擁有角蛋白酶基因資源產(chǎn)權(quán)最多和最具多樣性來(lái)源的單位；實(shí)現(xiàn)了角蛋白酶基因在大腸桿菌及枯草芽孢桿菌等外源宿主中的克隆及高效表達(dá)；在 5L 罐上發(fā)酵酶活最高可達(dá)10000 U/mL 以上，是目前文獻(xiàn)報(bào)道的重組角蛋白酶表達(dá)最高水平；項(xiàng)目已完成了 1M3 規(guī)模中試試驗(yàn)，成本降低 30%以上。在應(yīng)用方面，本項(xiàng)目成功將角蛋白酶用于生物法制備納米銀粒子 AgNPs，與傳統(tǒng)化學(xué)法相比，酶法合成的納米銀具有更好的抑菌活性。另外，項(xiàng)目組已首次開(kāi)發(fā)出無(wú)膠原活力的高特異性角蛋白酶，具有高角蛋白活力，不會(huì)對(duì)皮革膠原造成破壞，能保護(hù)膠原結(jié)構(gòu)完整性，可開(kāi)發(fā)出不傷及皮膚真皮的洗滌劑產(chǎn)品、藥品及化妝品，在生物制革領(lǐng)域也具有極大應(yīng)用價(jià)值，可緩解制革工業(yè)中的爛皮現(xiàn)象；同時(shí)本研究所開(kāi)發(fā)的角蛋白酶在活性多肽制備中也表現(xiàn)出良好的應(yīng)用前景。
江南大學(xué)
2021-04-13
農(nóng)業(yè)大學(xué).jpg){kind=logo}
一種酪蛋白凝膠顆粒乳化劑及其制備方法和用途
本發(fā)明公開(kāi)了一種酪蛋白凝膠顆粒乳化劑及其制備方法和用途。本發(fā)明中的酪蛋白凝膠顆粒乳化劑是通過(guò)向含有酪蛋白或酪蛋白酸鹽的溶液中添加京尼平進(jìn)行交聯(lián)制得的，交聯(lián)條件為在體系pH值為6～10.5、溫度為10～50℃的條件下交聯(lián)10～60h。所得交聯(lián)的蛋白凝膠顆粒表面含有大量的毛刷層結(jié)構(gòu)，能夠迅速地吸附到油水界面，可增加油水界面的機(jī)械強(qiáng)度，具有更高的乳化效果和乳化穩(wěn)定性，同時(shí)交聯(lián)的酪蛋白凝膠顆粒可在油水界面完整地存在，不會(huì)發(fā)生解離，具有較高的界面活性，空間位阻較大，能有效地防止液滴之間的聚集和聚并，可長(zhǎng)期穩(wěn)定水包油型乳狀液類食品。
中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)
2021-04-11
業(yè)大學(xué).jpg){kind=logo}
生長(zhǎng)因子類蛋白植物油體生物反應(yīng)器研制
隨著新功能基因的分離,克隆以及各種農(nóng)作物高效表達(dá)技術(shù)平臺(tái)的逐步建立,植物反應(yīng)器的研究越來(lái)越深入.本實(shí)驗(yàn)利用擬南芥(Arabidopsis thaliana)油體系統(tǒng)表達(dá)植物油體蛋白-角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子-2(Keratinocyte growth factor-2,KGF-2).首先人工合成植物密碼子偏好性的KGF-2基因,并通過(guò)PCR技術(shù)克隆了擬南芥油體蛋白Oleosin基因,構(gòu)建由種子特異性啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)的,含有油體蛋白和KGF-2融合基因的植物油體特異表達(dá)載體;通過(guò)農(nóng)桿菌介導(dǎo)法轉(zhuǎn)化野生型擬南芥,采用Basta篩選之后,獲得26株轉(zhuǎn)基因擬南芥.
吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)
2021-05-04
春大學(xué).jpg){kind=logo}
脲酶陰性,無(wú)豆腥味,可直接食用的大豆分離蛋白生產(chǎn)方法
本發(fā)明在大豆分離蛋白生產(chǎn)過(guò)程,增加了在加堿溶出蛋白浸出液后,蛋白濃度<3%的條件下,通過(guò)滅酶裝置,高溫(130°-145℃),瞬時(shí)(2-15秒),增加高溫滅酶工藝環(huán)節(jié)后,所產(chǎn)大豆分離蛋白脲酶反應(yīng)陰性,無(wú)豆腥味,可直接食用,對(duì)人體無(wú)害.本發(fā)明所產(chǎn)的新型分離蛋白,用于面制品或肉制品添加,均可保證取得產(chǎn)品無(wú)豆腥味的良好效果.
長(zhǎng)春大學(xué)
2021-04-30
科大學(xué).jpg){kind=logo}
特異抑制沙眼衣原體的優(yōu)化重組噬菌體蛋白的制備與應(yīng)用
相關(guān)專利制備出一種對(duì)衣原體的生長(zhǎng)具有明顯的特異抑制作用。該蛋白對(duì)沙眼衣原體有確切的特異的清除效果
天津醫(yī)科大學(xué)
2021-02-01
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一批潛在新冠病毒棘突蛋白抑制劑的研究
南方科技大學(xué)生物系副教授王冠宇研究團(tuán)隊(duì)、醫(yī)學(xué)院教授張健研究團(tuán)隊(duì)聯(lián)合深圳大學(xué)總醫(yī)院李海鷹研究團(tuán)隊(duì)初步篩選出一批新型冠狀病毒棘突蛋白(spike glycoprotein)潛在抑制劑，相關(guān)成果發(fā)布在預(yù)印版平臺(tái)Research Square。 研究表明，新冠病毒利用其包膜上的棘突蛋白識(shí)別人類細(xì)胞膜受體蛋白ACE2，從而侵染人類細(xì)胞，引發(fā)嚴(yán)重的呼吸道感染癥狀。阻止病毒棘突蛋白與人類受體蛋白ACE2相互作用是研發(fā)有關(guān)藥物、抗體和疫苗的重要方向。 新冠病毒棘突蛋白抑制劑篩選策略 聯(lián)合研究團(tuán)隊(duì)為加快有關(guān)抑制劑的發(fā)現(xiàn)，采用“老藥新用(Drug repurposing)”的策略，以公開(kāi)的RBD-ACE2復(fù)合物晶體結(jié)構(gòu)為靶點(diǎn)，通過(guò)同源建模(Homology Modeling)、計(jì)算機(jī)輔助藥物設(shè)計(jì)(Computer-aided drug design, CADD)和虛擬篩選(Virtual screening)等計(jì)算生物學(xué)方法，篩選了近15000個(gè)小分子化合物。這些化合物包含Drugbank化合物庫(kù)中所有的FDA批準(zhǔn)藥物，以及TCMSP化合物庫(kù)中的天然活性產(chǎn)物。研究團(tuán)隊(duì)將這些化合物與病毒棘突蛋白受體結(jié)合結(jié)構(gòu)域進(jìn)行分子對(duì)接，發(fā)現(xiàn)一批結(jié)合非常緊密的化合物，如Digitoxin,Nilotinib,Lemborexant，Raltegravir,Bisindigotin和 Evodiamine等。 Digitoxin與棘突蛋白結(jié)合模式圖 Bisindigotin與棘突蛋白結(jié)合模式圖
南方科技大學(xué)
2021-04-10
特異抑制沙眼衣原體的優(yōu)化重組噬菌體蛋白的制備與應(yīng)用
相關(guān)專利制備出一種對(duì)衣原體的生長(zhǎng)具有明顯的特異抑制作用。該蛋白對(duì)沙眼衣原體有確切的特異的清除效果應(yīng)用范圍:沙眼衣原體引起的泌尿生殖道感染的發(fā)病率居性傳播疾病之首，是美國(guó)最常見(jiàn)的疾病之一，在全部人群中感染占 10-19%，是引起前列腺炎和盆腔炎最主要的致病菌，可導(dǎo)致不孕和異位妊娠。目前臨床上沙眼衣原體的治療以抗生素為主，不僅治療效果不令人滿意，而且引起菌群失調(diào)，抵抗力下降等眾多的問(wèn)題。 經(jīng)過(guò)進(jìn)一步的人體實(shí)驗(yàn)，這種衣原體噬菌體蛋白可以轉(zhuǎn)化為臨床最為需求的、國(guó)際上首創(chuàng)的最新生物治療，特異性應(yīng)用于臨床沙眼衣原體感染的治療。效益分析:基于相關(guān)專利開(kāi)發(fā)應(yīng)用在沙眼衣原體生殖道感染的生物治療。 一、主要技術(shù)優(yōu)勢(shì)：分子量約 50kDa 的蛋白片段，免疫原性低，更容易進(jìn)入組織深層，制造成本低； 二、抑制率可達(dá) 65%-92%，對(duì)各型衣原體標(biāo)準(zhǔn)株和臨床病人中分離株。 三、這種良好的效果在生殖道衣原體感染小鼠模型中得到了驗(yàn)證
天津醫(yī)科大學(xué)
2021-04-10
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復(fù)合物理場(chǎng)協(xié)同強(qiáng)化菜籽蛋白糖基化改性的方法
其他成果/n一種復(fù)合物理場(chǎng)協(xié)同強(qiáng)化菜籽蛋白糖基化改性的方法，包括如下步驟：1)菜籽蛋白的制備；2)菜籽蛋白溶液的配制；3)蛋白質(zhì)?糖混合溶液的配制；4)微波?超聲波復(fù)合物理場(chǎng)協(xié)同處理；5)離心分離；6)透析與干燥。其中，步驟3)中，微波的功率為200～500W，超聲波的功率為100～300W，反應(yīng)體系的溫度為60～70℃，反應(yīng)時(shí)間為6～10min。本發(fā)明利用微波快速加熱效應(yīng)和超聲波的機(jī)械攪拌與加速擴(kuò)散作用，可避免反應(yīng)體系出現(xiàn)局部高溫現(xiàn)象，使糖基化反應(yīng)更為均勻；同時(shí)微波的電磁場(chǎng)與超聲波的空穴作用會(huì)在反應(yīng)體系中形成超臨界高溫與高壓的微環(huán)境及界面濃縮現(xiàn)象，從而避免傳統(tǒng)濕熱法下由于長(zhǎng)時(shí)間持續(xù)高溫作用而產(chǎn)生褐變物質(zhì)，消除了色澤對(duì)產(chǎn)品的影響。
武漢輕工大學(xué)
2021-04-11
業(yè)大學(xué).jpg){kind=logo}
復(fù)合蛋白酶解提取鴨硫酸軟骨素技術(shù)
本技術(shù)首先根據(jù)鴨胸軟骨的化學(xué)組成設(shè)計(jì)了一種用于提取鴨硫 酸軟骨素的新型復(fù)合蛋白酶的基礎(chǔ)配方，并利用復(fù)配酶制備鴨硫酸軟骨素，其 工藝包括鴨胸軟骨骨粉的制備、鴨胸軟骨骨粉的酶解提取、蛋白質(zhì)的沉降、硫 酸軟骨素粉末四個(gè)步驟。本發(fā)明采用了復(fù)配酶解法提取鴨胸軟骨的硫酸軟骨素， 采用新型復(fù)合蛋白酶和胰蛋白酶復(fù)配，去掉了堿提這一步，在復(fù)配酶使用上也 進(jìn)行了優(yōu)化，其收率比其它方法提高了 20%左右，產(chǎn)品純度達(dá)到 90%~95%。用復(fù) 合酶代替稀堿或濃堿解離軟骨能夠大大降低對(duì)環(huán)境的污染，并且可以有效縮短 生產(chǎn)周期、降低生產(chǎn)成本、增加了產(chǎn)品收率、提高產(chǎn)品質(zhì)量，填補(bǔ)了該領(lǐng)域的 空白。 技術(shù)優(yōu)點(diǎn)或者效益預(yù)測(cè):硫酸軟骨素(Chondroitinsulfate，CS)是 D-葡萄糖 醛酸和 N-乙酰氨基半乳糖以β-1,4-糖苷鍵連接而成的重復(fù)二糖單位組成的酸 性黏多糖。硫酸軟骨素具有抗凝血、抗炎癥、抗腫瘤、抗病毒、抗氧化、降血 脂、防止動(dòng)脈粥樣硬化、調(diào)節(jié)體內(nèi)水分、清除自由基和延緩衰老等多種生理功 能，可應(yīng)用于食品、藥品、各種保健品及高檔化妝品中。我國(guó)是全球硫酸軟骨 素產(chǎn)量最大的國(guó)家，占全球產(chǎn)量的 80%以上，年平均產(chǎn)量多于 4000 噸；我國(guó)硫 酸軟骨素主要出口到美國(guó)、歐洲、日本等地，其中美國(guó)作為我國(guó)硫酸軟骨素第 一大出口市場(chǎng)，出口份額約占 50%。所以，隨著硫酸軟骨素生物活性功能不斷研 究及其應(yīng)用領(lǐng)域的不斷擴(kuò)展，硫酸軟骨素用途越來(lái)越廣，具有廣闊市場(chǎng)應(yīng)用前 景。
青島農(nóng)業(yè)大學(xué)
2021-04-11
一種具有ACE抑制功能的魚(yú)肉蛋白肽及其制備方法
本發(fā)明提供了一種具有ACE抑制功能的魚(yú)肉蛋白肽及其制備方法，屬于食品加工技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明的魚(yú)肉蛋白肽制備方法包括：(1)制備去脂的魚(yú)肉漿液；(2)調(diào)節(jié)魚(yú)肉漿液溫度和pH值1?3，加入胃蛋白酶酶解；(3)調(diào)節(jié)溫度和pH值為6.5?8.0，加復(fù)合蛋白酶酶解；(4)酶解液高溫下保溫后冷至室溫，離心并取上清液通過(guò)二步超濾法處理；(5)濾液過(guò)柱分離，收集洗脫峰，即得。本發(fā)明方法適于產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)，不添加任何添加劑，制得的魚(yú)肉蛋白肽具有優(yōu)異的ACE抑制功能，IC50小于0.34mg/mL，肽中分子量小于1000D的肽比例為95％以上，易吸收，可廣泛應(yīng)用于特需食品和營(yíng)養(yǎng)食品的制造。
中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)
2021-04-11