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銀杏樹Ginkgo bilola L 是世界公認(rèn)的無公害樹種，為現(xiàn)存古代子遺植物之一，有裸子植物“活化石”之稱。銀杏葉存在兩類重要的生理活性物質(zhì)—黃酮類化合物（flavonoids）和萜內(nèi)酯（ginkglides and biobalide）,它們具有撲獲游離基，抑制血小板活化因子（PAF），促進(jìn)血液循環(huán)及腦代謝等功能。銀杏葉提取物制成的藥物、保健品和化妝品用于治療冠心病、心絞痛，增強(qiáng)記憶功能，治療老年癡呆和防治皮膚病，脫發(fā)等，效果顯著，幾乎沒有毒副作用，適用于長期的服用和使用。因此20世紀(jì)60年代以來，英、德、法和日本等國進(jìn)行了廣泛的研究，相繼推出了Tanakan、Tebonin、Forte、Ginkogink、Graton、Duophan等幾個(gè)著名品牌，到20世紀(jì)90年代末，銀杏制品的年銷售額已達(dá)40多億美元，成為世界的熱點(diǎn)產(chǎn)品。    我國銀杏樹擁有量占世界總量的70％以上，主要分布在長江中下游地區(qū)，銀杏葉資源極其豐富。但在綜合利用方面，提取工藝技術(shù)開發(fā)落后。在全國已建的200多家銀杏葉制品生產(chǎn)廠，主要用傳統(tǒng)的有機(jī)溶劑提取法和樹脂法生產(chǎn)銀杏葉提取物（簡稱GBE）出口供外商精加工。由于上述兩法生產(chǎn)的粗提物總收率和活性成分含量較低，質(zhì)量不穩(wěn)定，與國際認(rèn)可的GBE質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)（總黃酮≥24%、銀杏內(nèi)酯≥6％、銀杏酸＜10㎎/㎏﹚相比，存在一定差距，丟掉了精加工所產(chǎn)生的巨額利潤。隨著國際市場競爭的加劇，外商對我國GBE的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)趨嚴(yán)，加之國內(nèi)銀杏葉系列產(chǎn)品開發(fā)需要高品質(zhì)的GBE，傳統(tǒng)的提取工藝漸不能滿足市場的要求。    超臨界CO2萃取技術(shù)（SFE），是國外20世紀(jì)70年代出現(xiàn)并投入工業(yè)化生產(chǎn)的一種用于物質(zhì)分離的高新技術(shù)。它采用CO2作萃取介質(zhì)，在常溫下工作，活性成分和熱不穩(wěn)定成分不易被分解破壞而保持天然特征，可以高效快速地從植物中提取精華，對產(chǎn)品及環(huán)境無污染和三廢排放，同時(shí)通過控制臨界溫度和壓力的變化，可以達(dá)到選擇性提取和分離純化天然產(chǎn)物的目的。用超臨界CO2萃取技術(shù)提取銀杏黃酮和萜內(nèi)酯，是當(dāng)今世界范圍發(fā)展的趨勢，目前歐美國家已大量使用這種技術(shù)提取出的物質(zhì)，其市場前景十分廣闊。    針對上述，武漢化工學(xué)院制藥系與化工系長期從事天然成份研究和化工過程研究的專家、教授利用自身的技術(shù)優(yōu)勢和學(xué)科特色，對超臨界CO2萃取提取銀杏黃酮和內(nèi)酯的工藝技術(shù)進(jìn)行了深入的研究，并獲得湖北省2000年度自然科學(xué)基金資助。現(xiàn)已在萃取體積為1L的超臨界萃取裝置上完成小試研究工作，確定了CO2——SFE提取銀杏黃酮和內(nèi)酯的較佳工藝條件（萃取溫度、壓力、時(shí)間），選擇出合適的夾帶劑種類、用量，進(jìn)行了原料和產(chǎn)品的質(zhì)量控制分析。正準(zhǔn)備尋求合作伙伴進(jìn)行工業(yè)化技術(shù)開發(fā)。

本發(fā)明公開了一種加速溶劑萃取-高速逆流色譜聯(lián)用方法及其裝置。采用加速溶劑萃取裝置提取物料得到提取液,采用儲液瓶收集;將提取液通過蠕動(dòng)泵泵入定量環(huán);將儲液瓶中的固定相采用柱塞泵泵入高速逆流色譜儀,啟動(dòng)高速逆流色譜儀,同時(shí)用柱塞泵將儲液瓶中的流動(dòng)相泵入高速逆流色譜儀,進(jìn)行溶劑體系平衡;將定量環(huán)中的樣品溶液泵入高速逆流色譜儀,采用制備型高速逆流色譜純化制備得到目標(biāo)組分,或采用分析型高速逆流色譜分析天然產(chǎn)物提取液中的目標(biāo)組分;上述步驟通過切換閥集成加速溶劑萃取與高速逆流色譜于一體,實(shí)現(xiàn)天然產(chǎn)物有效成分的在線提取分離與純化制備,具有快速高效、自動(dòng)化程度高的特點(diǎn).

本發(fā)明涉及辣椒疫霉病菌(Phytophthora capsici)中的幾丁質(zhì)合酶。其氨基酸序列為與如SEQ ID No.4所示的氨基酸序列在相似性在90％以上，優(yōu)選在95％以上，更優(yōu)選在98％以上且具有與如SEQ ID No.4所示的氨基酸序列相同功能的氨基酸序列。所述辣椒疫霉病菌的幾丁質(zhì)合酶的活性水平能夠調(diào)節(jié)活性孢子囊和活性游動(dòng)孢子的產(chǎn)量從而影響辣椒疫霉病菌的致病力或寄主的發(fā)病程度。

研究背景 ：植物的病毒病一直嚴(yán)重危害以營養(yǎng)繁殖為主的作物的產(chǎn)量 和品質(zhì)。目前，對植物病毒病尚無有效的農(nóng)藥治療，防治它們最方便可靠 的措施是利用生物技術(shù)培育脫毒種苗。 在我省的食用百合生產(chǎn)中主要存在 二個(gè)問題：一是種源退化；二是病害猖獗，嚴(yán)重影響了食用百合產(chǎn)量和品 質(zhì)。造成上述兩個(gè)問題的主要原因是百合種球積累大量病毒和攜帶其它們 病原物所致。植物生物技術(shù)中的脫毒技術(shù)（包括熱處理、莖尖培養(yǎng)、快速 繁殖和脫毒

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