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01.成果簡(jiǎn)介   “相”是指物質(zhì)系統(tǒng)中物理、化學(xué)性質(zhì)完全相同，與其他部分具有明顯分界面的均勻部分。“相變”是指物質(zhì)從一種相轉(zhuǎn)變?yōu)榱硪环N相的過程。與固、液、氣三態(tài)對(duì)應(yīng)，物質(zhì)有固相、液相、氣相。有研究表明，相變機(jī)制也廣泛存在于生物細(xì)胞中，且在細(xì)胞生命周期的時(shí)空調(diào)控等方面發(fā)揮著重要的生物學(xué)功能。當(dāng)溶液中的多價(jià)大分子與其多價(jià)配體互作時(shí)，容易產(chǎn)生更大的復(fù)合物，后者的溶解度一般會(huì)降低，從而從普通溶液相分離出來，形成一個(gè)復(fù)合物富集的獨(dú)立的液態(tài)相，這個(gè)轉(zhuǎn)變過程被稱為“液-液分離相變”（即，“相變”）。 蛋白質(zhì)翻譯后修飾是指蛋白質(zhì)翻譯完成后，發(fā)生在蛋白質(zhì)的特定氨基酸殘基上的共價(jià)修飾過程，是蛋白質(zhì)生物合成的步驟之一。目前，已知存在300多種翻譯后修飾，常見的有甲基化、乙?；⒘姿峄?、泛素化、糖基化修飾等，與蛋白質(zhì)翻譯后修飾相反的修飾過程為蛋白質(zhì)去修飾，如去甲基化、去乙?；?、去磷酸化、去泛素化、去糖基化等。 本項(xiàng)成果是一種檢測(cè)翻譯后/復(fù)制后/轉(zhuǎn)錄后修飾的蛋白質(zhì)/DNA/RNA與其修飾閱讀器間相互作用的成套試劑，由A、B、C和D四種試劑組成；（1）A由名稱為R的生物分子和名稱為X的蛋白質(zhì)連接而成；（2）B含有名稱為L(zhǎng)的生物分子；R與L相同或不同且二者間具有相互作用，R與L相互作用后發(fā)生相變；（3）C為由C單體形成的多聚體，C單體由名稱為mc的單體、名稱為甲的報(bào)告基團(tuán)和名稱為YC的生物分子連接得到的分子，大于等于兩個(gè)的mc能形成多聚體；（4）D由名稱為XL的帶有修飾的蛋白質(zhì)和名稱為YD的生物分子連接而成；YC與YD間具有相互作用。通過該成套試劑及基于該成套試劑創(chuàng)建的多價(jià)招募系統(tǒng)，利用相變機(jī)制實(shí)現(xiàn)了互作蛋白和配體在相變液滴中的高度富集，將原本較弱的互作信號(hào)強(qiáng)烈放大，使其易于檢測(cè)。02.應(yīng)用前景 本項(xiàng)成果可以為檢測(cè)經(jīng)翻譯后/復(fù)制后/轉(zhuǎn)錄后修飾的蛋白質(zhì)/DNA/RNA與其修飾閱讀器間的相互作用提供一種全新的技術(shù)手段。該技術(shù)尤其適合高通量篩選修飾酶或去修飾酶的抑制劑或促進(jìn)劑。03.知識(shí)產(chǎn)權(quán) 本項(xiàng)成果已申請(qǐng)1項(xiàng)發(fā)明專利。04. 團(tuán)隊(duì)介紹 本項(xiàng)成果負(fù)責(zé)人為清華大學(xué)研究員、博士生導(dǎo)師、清華大學(xué)結(jié)構(gòu)生物學(xué)高精尖創(chuàng)新中心成員、清華-北大生命科學(xué)聯(lián)合中心成員、中組部“青千”基金獲得者，主要從事“相變”相關(guān)領(lǐng)域的研究，并探索能夠廣泛應(yīng)用于鑒定生物大分子互作及互作調(diào)控物篩選的新技術(shù)。研究成果發(fā)表于多個(gè)國際頂級(jí)權(quán)威期刊，申請(qǐng)專利多項(xiàng)。05.合作方式 專利許可、合作開發(fā)。06.聯(lián)系方式 zhangxinrui@tsinghua.edu.cn

【發(fā) 明 人】樊文玲；肖偉；郭峰；潘林梅；朱運(yùn) 【摘要】 堿性中藥活性蛋白類成分吸附后膜的吸附和解吸裝置及吸附和解吸方法。該裝置由膜組件、循環(huán)泵、提取液或解吸液雙層儲(chǔ)料槽、滲透液儲(chǔ)料槽、壓力表、流量計(jì)、恒溫水浴、蠕動(dòng)泵、不銹鋼管道制成。該方法為：在0.25MPa下恒溫，膜超濾吸附含量為98%的堿性中藥活性蛋白類提取物溶液24h，計(jì)算活性成分吸附量，將吸附后的膜裝在解吸裝置上，將pH為5的鹽酸溶液作為解吸劑，恒溫，在壓力小于0.05MPa和膜面流速在0.1-1m/s條件下進(jìn)行解吸，得解吸率95%-99%。該方法和裝置適用于堿性中藥蛋白類成分的膜精制過程，尤其是注射劑除熱原和樹脂過程，可大大降低該類活性成分的損失率，提高其轉(zhuǎn)移率，同時(shí)膜獲得較好的再生。

血管活性腸肽(vasoactiveintestinalpeptide，VIP)是一種由 28 個(gè)氨基酸組成的多肽，主要是由外周神經(jīng)和中樞神經(jīng)系統(tǒng)產(chǎn)生，由副交感神經(jīng)節(jié)后纖維釋放，并且與乙酰膽堿共同存在，被認(rèn)為是胰高血糖素-胰泌素家族的一員。廣泛分布在中央神經(jīng)系統(tǒng)的類膽堿突觸前神經(jīng)細(xì)胞和外周肽能神經(jīng)細(xì)胞中，通過它可對(duì)多種器官進(jìn)行神經(jīng)支配，比如心臟，肺，消化系統(tǒng)和泌尿生殖道，眼睛，皮膚，卵巢和甲狀腺。VIP 在中樞和外周神經(jīng)系統(tǒng)中是一種重要的信號(hào)肽，通過其受體發(fā)揮生理作用，迄今為止，已有 3 種類型的 V

積極地從血液中去除β2-MG可以有效地預(yù)防和治療DRA。 一、項(xiàng)目分類 關(guān)鍵核心技術(shù)突破 二、成果簡(jiǎn)介 β2微球蛋白(β2-Microglobulin，β2-MG)是由淋巴細(xì)胞、血小板、多形核白細(xì)胞產(chǎn)生的一種小分子球蛋白，是主要組織相容性復(fù)合物(MHC-Ⅰ )的輕鏈部分，由99個(gè)氨基酸組成，分子量為11.8KD，半徑1 .6nm，可以從腎小球自由濾過，99.9％在近端腎小管吸收，并在腎小管上皮細(xì)胞中分解破壞。正常人血清中β2-MG的含量是0 .5～3mg/L。長(zhǎng)期接受透析治療的腎損傷患者體內(nèi)β2-MG容易產(chǎn)生積聚，從而引發(fā)透析相關(guān)性淀粉樣病變(DialysisRelated Amyloidosis，DRA)。病理?xiàng)l件下，腎損傷患者血液中的β2-MG的含量是正常水平的50-60倍，約為84mg ,主要癥狀表現(xiàn)為關(guān)節(jié)和關(guān)節(jié)周圍組織淀粉樣蛋白的沉積，從而導(dǎo)致骨骼和關(guān)節(jié)的病原性病變。透析多年的腎病患者，DRA臨床癥狀包括腕管綜合征(CTS)、骨關(guān)節(jié)病、破壞性關(guān)節(jié)病、囊性骨病和病理骨折。血液透析治療15年以上的患者，將出現(xiàn)系統(tǒng)性淀粉樣病變。因此，積極地從血液中去除β2-MG被認(rèn)為是有效地預(yù)防和治療DRA。

我國淡水魚資源豐富。魚蛋白酶解液是一種高蛋白、低脂肪的蛋白水解制品， 但是不易貯存和加工，將酶解之后酶解液進(jìn)行噴霧干燥得到水解蛋白粉，不僅利于貯存和運(yùn)輸，而且為酶解液的后續(xù)利用提供了便利，既可以作為一種安全的食品配料，也可以直接沖調(diào)飲用。氨基酸分析也顯示魚水解蛋白粉的氨基酸組成與人體肌肉成分極為接近，易于被人體攝入吸收且利用率很高，是良好的蛋白質(zhì)強(qiáng) 化劑。 蛋白粉的溶解度對(duì)蛋白粉的應(yīng)用范圍影響很大，而國內(nèi)關(guān)于低分子量高溶解度蛋白粉的制備尚處于空白狀態(tài)。 本發(fā)明制得的魚水解蛋白粉的分子量低；溶解度達(dá)到 95%以上；利用淡水魚生產(chǎn)，來源豐富；本發(fā)明為淡水魚的高值化利用提供了一條新的途徑；利用生物酶解技術(shù)，效率高，無污染；產(chǎn)品安全有效、無毒副作用；低分子量的魚水解蛋白粉比魚蛋白更易消化吸收，可以作為食品原料或輔料應(yīng)用于嬰幼兒營養(yǎng)配方食品、方便食品、速溶飲品和調(diào)味品等，市場(chǎng)前景廣闊。

 本發(fā)明獲得的西伯利亞花楸果實(shí)提取物，通過提取物對(duì)胃癌細(xì)胞BGC823抑制率的研究表明：西伯利亞花楸果實(shí)提取物具有很強(qiáng)的抑制胃癌細(xì)胞生長(zhǎng)的能力，當(dāng)提取物濃度為200μg/mL，培養(yǎng)48h時(shí)，抑制率就達(dá)到50%。

本發(fā)明涉及一種海帶內(nèi)生真菌及其在制備生物活性提取物方面的應(yīng)用，所述海帶內(nèi)生真菌的菌種保藏信息為：保藏單位名稱：中國微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心；保藏單位地址：北京市朝陽區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào)，中國科學(xué)院微生物研究所；保藏日期：2018年1月2日；保藏編號(hào)：CGMCC No.15181；分類命名：鏈格孢Alternaria sp.W-1。

本發(fā)明公開了Bacillus horneckiae DSM23495發(fā)酵提取物在防治植物病害與甜菜夜蛾中的應(yīng)用，屬于微生物農(nóng)藥領(lǐng)域。所述菌株保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，保藏編號(hào)為CGMCC No.13551。所述Bacillus horneckiae DSM23495發(fā)酵提取物經(jīng)培養(yǎng)基搖床發(fā)酵，乙酸乙酯萃取，硅膠柱層析得到，對(duì)番茄灰霉病菌、棉花枯萎病菌、蘋果腐爛病菌與白菜黑斑病菌等植物病害具有較好的抑制活性，最小抑制濃度（MIC）分別為4、8、8與10μg/mL；此外，對(duì)甜菜夜蛾也具有較好的殺蟲活性，0.4 mg/mL濃度，抑制取食率達(dá)86.1±2.2%。因此，Bacillus horneckiae DSM23495發(fā)酵提取物可用于制備防治植物病害與甜菜夜蛾的微生物農(nóng)藥，相比化學(xué)合成農(nóng)藥，不易產(chǎn)生抗藥性且環(huán)境兼容性好，具有較好的應(yīng)用前景。

本發(fā)明涉及一種海洋真菌發(fā)酵提取物及其作為抗老年癡呆藥物的應(yīng)用，所述提取物由如下步驟制備：(1)在無菌條件下，將海洋真菌Alternaria sp.W?1接種到PD液體培養(yǎng)基中，恒溫?fù)u床振蕩培養(yǎng)，溫度為25?30℃，搖床轉(zhuǎn)速為150?180r/min，培養(yǎng)時(shí)間為2?4d，得種子液；(2)將步驟(1)得到的種子液接種到察氏培養(yǎng)基中，培養(yǎng)基pH為4.0?8.0，接種量為5?20％，培養(yǎng)溫度為22?34℃，培養(yǎng)時(shí)間為6?14d，得發(fā)酵物；(3)將步驟(2)得到的發(fā)酵物用3?5層無菌紗布過濾，得濾液，經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮后，用乙酸乙酯萃取2?4次，合并有機(jī)相，經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮即得所述提取物。

【發(fā) 明 人】唐于平；姚鑫；段金廒；錢大瑋；宿樹蘭 【摘要】 本發(fā)明公開了一種以銀杏落葉為原料的銀杏葉精制提取物及其制備方法，本發(fā)明以銀杏落葉為原料，加入乙醇回流提取，合并提取液，濾過，濃縮，加水溶散，過濾，濾液上AB-8樹脂柱吸附，先用水洗澄清后，再用90%~95%乙醇解吸，收集90%~95%乙醇洗脫液，濃縮液上聚酰胺柱，先用水洗，再用70%~75%甲醇解吸，收集70%~75%甲醇洗脫液，濃縮，干燥，得含有30%~45%總黃酮和7%~15%總內(nèi)酯的精制提取物。本發(fā)明以廢棄的銀杏落葉為提取原料，變廢為寶，通過優(yōu)選工藝制得含有總黃酮和總內(nèi)酯活性成分高的精制提取物，具有很好的抗氧化，抗血小板聚集及其神經(jīng)元細(xì)胞保護(hù)作用，且不良反應(yīng)低，可作為防治心腦血管疾病的藥物與保健食品的主要原料，具有重要的經(jīng)濟(jì)效應(yīng)和環(huán)境保護(hù)作用。