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本發(fā)明涉及一種重型肝炎相關(guān)基因啟動子甲基化狀態(tài)的檢測方法和試劑盒。 本發(fā)明通過表觀遺傳技術(shù)和分子生物學(xué)技術(shù)，建立了人谷胱甘肽硫轉(zhuǎn)移酶 P1 （GSTP1）甲基化程度定性檢測平臺，為重型肝炎的預(yù)警、病情監(jiān)測及預(yù)后預(yù) 測提供快捷、敏感、特異、可靠的科學(xué)檢測方法。

本發(fā)明屬于醫(yī)藥及生物工程領(lǐng)域，涉及一種可用于艾滋病基因治療的 CRISPR/Cas9 重組慢病毒載體 及其慢病毒，該重組慢病毒載體由慢病毒載體 lentiCRISPR 用 BsmBI 酶切后，連入帶 BsmBI 粘性末端 的 CXCR4 特異靶序列重組而得，獲得的 CRISPR/Cas9 重組慢病毒載體能夠在艾滋病毒輔助受體 CXCR4 的 4&nbs

在該研究中，收集了公共數(shù)據(jù)集（大量RNA-seq和單細(xì)胞RNA-seq）發(fā)現(xiàn)ACE2在胰腺（外分泌腺和胰島中）的表達(dá)和分布。而且，包括輕度和重度COVID-19患者在內(nèi)的臨床數(shù)據(jù)表明存在輕度胰腺炎。在這67例嚴(yán)重病例中，有11例（16.41％）的患者的淀粉酶和脂肪酶水平升高，有5例（7.46％）的患者顯示胰腺影像學(xué)改變。在54例輕度病例中，只有一名患者（1.85％）顯示淀粉酶和脂肪酶水平升高，而沒有影像學(xué)改變。該研究揭示了COVID-19患者輕度胰腺損傷的現(xiàn)象和可能的原因。這表明SARS-CoV-2感染后的胰腺炎也應(yīng)在臨床工作中予以重視。

近日，國際學(xué)術(shù)期刊Small刊載了華中農(nóng)業(yè)大學(xué)理學(xué)院梁建功教授課題組和動科動醫(yī)學(xué)院肖少波教授課題組合作發(fā)表的題為“Glycyrrhizic‐Acid‐Based Carbon Dots with High Antiviral Activity by Multisite Inhibition Mechanisms”的研究論文，該研究合成了具有高生物相容性及高抗病毒活性的甘草酸碳點(diǎn)，并揭示了碳點(diǎn)的抗病毒機(jī)制。中草藥在抗病毒領(lǐng)域具有廣闊的應(yīng)用前景，在最近爆發(fā)的新型冠狀病毒肺炎的治療過程中，中草藥的參與度超過80%。然而，單一成分的中草藥抗病毒效果往往不高，且存在一定的毒副作用，如何進(jìn)一步提高中草藥的抗病毒效果，降低其毒副作用，成為該領(lǐng)域需要解決的一個(gè)關(guān)鍵科學(xué)問題。甘草酸碳點(diǎn)抗病毒機(jī)制示意圖該研究利用水熱合成技術(shù)，成功將中草藥甘草的活性成分——甘草酸轉(zhuǎn)化為具有良好生物相容性及高的抗病毒活性的甘草酸碳點(diǎn)（Gly-CDs）。研究發(fā)現(xiàn)，Gly-CDs不僅可與病毒多靶點(diǎn)結(jié)合從而抑制病毒的入侵過程，還可通過刺激細(xì)胞天然免疫信號通路、抑制活性氧、調(diào)控細(xì)胞內(nèi)宿主限制性因子等途徑抑制病毒的復(fù)制過程，其對病毒的最大抑制效果可達(dá)5個(gè)滴度以上。Gly-CDs對豬繁殖與呼吸綜合征病毒（動脈炎病毒科）、豬偽狂犬病毒（皰疹病毒科）及豬流行性腹瀉病毒（冠狀病毒科）均具有良好的抑制效果。華中農(nóng)業(yè)大學(xué)理學(xué)院/資環(huán)學(xué)院博士研究生童婷為論文第一作者，梁建功教授、肖少波教授為共同通訊作者。該研究得到了國家自然科學(xué)基金(31490602, 31772785)及國家重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃(2016YFD0500105)等基金的資助。

2020年1月22日，華中科技大學(xué)附屬同濟(jì)醫(yī)院專家組根據(jù)包括華中科技大學(xué)附屬同濟(jì)醫(yī)院在內(nèi)的武漢各大醫(yī)療機(jī)構(gòu)診治的第一批患者的第一手資料制定了《新型冠狀病毒肺炎診療快速指南》（簡稱《指南》）。 《指南》內(nèi)容包括新型冠狀病毒肺炎究竟有什么癥狀，如何檢測，如何確認(rèn)，如何治療，怎樣做好個(gè)人防護(hù)，出院后需要注意什么等內(nèi)容：新型冠狀病毒病原學(xué)特點(diǎn)；起病以發(fā)熱為主要表現(xiàn)；發(fā)熱患者合并哪些癥狀要懷疑被感染；新型冠狀病毒肺炎需要鑒別的疾病；抗病毒藥、抗菌藥物以及激素應(yīng)用需要注意；老人、孕產(chǎn)婦病情進(jìn)展相對更快；出院患者要按時(shí)隨訪。

從2019年12月開始，中國衛(wèi)生部門一直在密切監(jiān)測湖北省武漢市的一系列肺炎病例。在受影響的個(gè)體中引起病毒性肺炎的病原體是新的冠狀病毒SARS-CoV-2。截至2020年3月3日，中國大陸共發(fā)現(xiàn)并確診80,151例；在國際上，在72個(gè)國家中發(fā)現(xiàn)并確診的病例超過10,566例。在這項(xiàng)工作中，研究人員模擬了新型冠狀病毒病（COVID-19）在國內(nèi)和國際的傳播，同時(shí)該研究估算了2020年2月上旬武漢實(shí)施的旅行禁令和一些國家所采用的國際旅行限制的影響。為了模擬COVID-19暴發(fā)的國際傳播，該研究使用了全球流行和流動模型（GLEAM），這是一個(gè)基于個(gè)體，隨機(jī)和空間的流行模型。GLEAM使用與真實(shí)世界數(shù)據(jù)集成的元人口網(wǎng)絡(luò)方法，將世界分為圍繞主要交通樞紐的子人口。該模型包括大約200個(gè)不同國家和地區(qū)的3200多個(gè)子種群。在每個(gè)亞人群中，COVID-19在人與人之間的傳播均使用該疾病的區(qū)室表示來建模，其中個(gè)體可以占據(jù)以下狀態(tài)之一：易感性（S），潛伏性（L），傳染性（I）和已刪除（R）。該模型生成了一組可能的流行病場景，這些場景由新產(chǎn)生的感染數(shù)，每個(gè)亞人群中疾病的到達(dá)時(shí)間以及傳播感染的攜帶者數(shù)來描述。該研究假設(shè)疫情的開始日期在11/15/2019至12/1/2019之間，其中40例是由人畜共患病引起的。通過使用近似貝葉斯計(jì)算方法來校準(zhǔn)傳播動態(tài)，從而估計(jì)基本繁殖數(shù)R0。

2月5日，復(fù)旦大學(xué)生物醫(yī)學(xué)研究院藍(lán)裴、樊嘉等人在bioRxiv上發(fā)表研究成果未經(jīng)同行評議論文，發(fā)現(xiàn)新冠肺炎患者可能出現(xiàn)肝損傷并建議進(jìn)行專門的肝功能護(hù)理。 基于兩項(xiàng)獨(dú)立的單細(xì)胞測序數(shù)據(jù)，研究者在健康人類肝臟和大腸癌患者的肝臟樣本中，均發(fā)現(xiàn)了ACE2在肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞中的特異性表達(dá)。膽管上皮細(xì)胞在肝再生和免疫反應(yīng)中有關(guān)鍵作用。這意味著2019-nCov可能不會靶向肝細(xì)胞，或至少不會通過ACE2靶向肝細(xì)胞。因此，其導(dǎo)致的肝損害，可能是由于病毒感染了膽管細(xì)胞，而非直接感染肝細(xì)胞。研究人員指出，2019-nCov肺炎患者出現(xiàn)肝功能異常，可能是由治療中使用的藥物引發(fā)，或由肺炎引起的全身性炎癥反應(yīng)所致。 

成果介紹本成果擬采用干式熒光免疫層析、電化學(xué)、分子診斷等檢測技術(shù)，將陸續(xù)研發(fā)完成PCT/CRP檢測試劑盒（干式熒光免疫層析法）、SAA/CRP檢測試劑盒（干式熒光免疫層析法）、凝血時(shí)間檢測試劑盒（電化學(xué)法）、新型冠狀病毒（2019-nCoV）核酸檢測試劑盒（RT-PCR熒光探針法）等項(xiàng)目及對應(yīng)的干式熒光免疫層析、電化學(xué)手持式檢測儀器。技術(shù)創(chuàng)新點(diǎn)及參數(shù)本成果計(jì)劃采用免疫POCT+分子診斷的方法對新型冠狀病毒進(jìn)行篩查診斷和治療監(jiān)測。前期采用手持式免疫POCT產(chǎn)品對CRP/PCT/SAA三個(gè)炎癥指標(biāo)進(jìn)行快速檢測，判斷是否為病毒感染，而后采用《新型冠狀病毒核酸檢測試劑盒（RT-PCR熒光探針法）》對病人樣本中的病毒核酸進(jìn)行檢測，判斷是否有新型冠狀病毒的感染；確診為感染陽性后，在日常治療過程中，利用手持式儀器快速檢測感染情況、監(jiān)測病人CRP/PCT/SAA炎癥指標(biāo)、凝血狀態(tài)的變化情況，分析治療方案是否合理。出院前，再對病人進(jìn)行新型冠狀病毒核酸檢測，判斷是否感染陰性。該項(xiàng)目可以對感染疑似病例全流程進(jìn)行監(jiān)控，包含了初篩排除、核酸確診、日常監(jiān)測、出院檢查四個(gè)過程。市場前景該技術(shù)是依托基因芯片（依賴進(jìn)口，國內(nèi)無法生產(chǎn)），通過堿基互補(bǔ)的原理，在引物或探針上標(biāo)記可檢測的物質(zhì)，將所需的探針掛載于基因芯片上，與待檢樣品進(jìn)行雜交，通過雜交的信號進(jìn)行結(jié)果判讀，其中掛載的好壞體現(xiàn)出了高校科研力量。其核心的掛載工藝，可以針對不同的疾病檢測要求掛載不同探針，非常具有普適性，目前針對新型冠狀病毒已經(jīng)和江蘇一家企業(yè)對接并著手產(chǎn)品化，但掛載技術(shù)類似汽車組裝技術(shù)，可以作為重點(diǎn)推廣對象對接其他類似需求的廠家，快速提升各地方診斷設(shè)備自給能力。

本項(xiàng)目擬采用干式熒光免疫層析、電化學(xué)、分子診斷等檢測技術(shù)，將陸續(xù)研發(fā)完成PCT/CRP檢測試劑盒（干式熒光免疫層析法）、SAA/CRP檢測試劑盒（干式熒光免疫層析法）、凝血時(shí)間檢測試劑盒（電化學(xué)法）、新型冠狀病毒（2019-nCoV）核酸檢測試劑盒（RT-PCR熒光探針法）等項(xiàng)目及對應(yīng)的干式熒光免疫層析、電化學(xué)手持式檢測儀器。?本項(xiàng)目計(jì)劃采用免疫POCT+分子診斷的方法對新型冠狀病毒進(jìn)行篩查診斷和治療監(jiān)測。前期采用手持式免疫POCT產(chǎn)品對CRP/PCT/SAA三個(gè)炎癥指標(biāo)進(jìn)行快速檢測，判斷是否為病毒感染，而后采用《新型冠狀病毒核酸檢測試劑盒（RT-PCR熒光探針法）》對病人樣本中的病毒核酸進(jìn)行檢測，判斷是否有新型冠狀病毒的感染；確診為感染陽性后，在日常治療過程中，利用手持式儀器快速檢測感染情況、監(jiān)測病人CRP/PCT/SAA炎癥指標(biāo)、凝血狀態(tài)的變化情況，分析治療方案是否合理。出院前，再對病人進(jìn)行新型冠狀病毒核酸檢測，判斷是否感染陰性。

針對體溫檢測只能檢測已有癥狀感染者，核酸檢測需要相關(guān)配套設(shè)備且時(shí)間較長的問題，在廣西科技廳疫情應(yīng)急管理項(xiàng)目的支持下，學(xué)校“廣西八桂學(xué)者”陳真誠教授團(tuán)隊(duì)放棄寒假，迎難而上，勇于擔(dān)當(dāng)，聯(lián)合桂林世康醫(yī)療科技有限公司于2月初開始日以繼夜地聯(lián)合攻關(guān)。經(jīng)過多次試驗(yàn)篩選出最佳的實(shí)驗(yàn)配方和合理的制備工藝，并于2月12日成功研制出一款專門用于新型冠狀病毒快速檢測試紙，在桂林市疾控中心和南寧第四人民醫(yī)院等定點(diǎn)醫(yī)院進(jìn)行了批量臨床樣本測試，檢測時(shí)間僅需10分鐘，臨床測試結(jié)果與核酸檢測結(jié)果匹配度達(dá)到100%，目前科研成果正在重慶大學(xué)附屬醫(yī)院和解放軍總醫(yī)院派駐武漢醫(yī)療隊(duì)進(jìn)行更大范圍測試。